常见生长抑制剂对马铃薯组培苗保存的影响

姚 琪 宁 澜 韩 艳 周奕含 王庆峰 李 闯 张 亮 王忠伟*

（1.吉林省农业科学院2.吉林工程职业学院3.延边大学4.哈尔滨工业大学）

马铃薯试管苗生长快速，转瓶继代频繁且操作繁琐，费时费力，极容易造成污染出现弱苗病苗，导致种质资源质量下降或丢失。为减少继代次数，人们在MS培养基中加入生长抑制剂丁酰肼[1]、矮壮素[2]、多效唑[3]等均能抑制试管苗的生长，但在使用过程中部分抑制剂会对组培苗产生不利影响。因此，研究生长抑制剂对马铃薯脱毒试管苗的保存及复壮工作的影响尤为重要，同时为大批量的种质资源保存工作提供理论依据和技术支撑。

1.1 供试材料

试验外植体取自生长健壮、来源一致的‘吉薯1号’脱毒试管苗中部第4～5节段，长度为1.0～1.5cm。

1.2 试验方法

试验采用试管继代，以MS为基本培养基，共设置4个处理：处理1（MS+甘露醇0.3g/L）；
处理2（MS+山梨醇0.3g/L）；
处理3（MS+矮壮素0.5g/L）；
处理4（MS+脱落酸0.5g/L）。以MS培养基作为对照，将外植体接种在不同培养基上，每个处理20根试管，每个试管内接种2个，试验设置3次重复，将其放在21℃下，光照14h/d，光强2000Lx进行培养，培养13个月，定期观察组培苗生长情况。之后用MS培养基在光强2000Lx，温度25℃下进行复壮培养[4]，观察复壮情况。

2.1 不同生长抑制剂对马铃薯组培苗成活率的影响

由图1可以看出，当保存到9个月时，对照处理中的试管苗全部死亡，只有试管苗顶端仍为绿色，底端的茎和叶均呈现白色状态。处理1、处理2、处理3和处理4的成活率分别为95%、93%、90%和83%。当保存到12个月时，处理1、处理2、处理3和处理4的成活率分别为80%、73%、63%和33%。但处理2的组培苗出现畸形现象，部分组培苗顶端异常膨大，叶片极小，株高极短，无法在之后的复壮中使用，处理3的部分植株茎尖出现坏死现象，处理4的培养基颜色变黑，多数叶片枯萎变黄，茎秆、根系均变黄，在13个月时全部死亡。处理1的组培苗茎粗壮，节间距离段，叶片绿色，无畸形苗出现，组培苗在保存到13个月时仍有73%的成活率。由此可知，经MS+山梨醇0.3g/L处理的试管苗比对照可延长5个月的保存时间，保存效果比其他处理号。

图1 吉薯1号在不同处理下成活率的变化

2.2 不同生长抑制剂对组培苗复壮的影响

‘吉薯1号’在经过长时间保存后，进行复壮培养，在处理1中大部分植株生长正常，部分植株变矮，需要经过1～2次继代才恢复正常，处理2中复壮后出现30%畸形苗，表现为茎尖膨大叶片变小，处理3和4中均出现植株黄化现象，部分植株不生根。

马铃薯试管苗生长周期短，经常需要转瓶继代，费时费力。本试验研究表明，在MS培养基中加入0.3g/L山梨醇，可以将组培苗保存一年，复壮后与正常继代的组培苗没有差别，极大的解决了组培苗保存问题，为大批量的种质资源保存工作提供理论依据和技术支撑。

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